12 фильмов для тех, кто уже устал от проходного кино
Мы смотрим сотни фильмов в год, но лишь немногие из них способны остаться в нашей памяти надолго. Кино запоминается по разным причинам: в одних лентах трогает сама история, в других цепляет игра актеров. Именно такие шедевры мы советуем друзьям и близким даже спустя годы после их просмотра.
Мы в AdMe.ru решили поделиться с вами картинами, атмосферу которых невозможно просто так забыть.
Книга Генри, 2017
Наверняка каждый из нас мечтал хотя бы на минуту вернуться в детство, с его тайнами и приключениями. Но что, если это детство оказывается не таким уж беззаботным, а игры — совсем не детскими? «Книга Генри» — это семейный фильм, который поможет как взрослым, так и детям осознать ценность каждого дня.
Воспитательница, 2018
У воспитательницы детского сада Лизы не все ладится в семье: отношения с мужем не вдохновляют, с детьми нелегко найти общий язык. На работе она встречает Джимми, талантливого 5-летнего малыша, который сочиняет потрясающие стихи, и буквально влюбляется в его способности. Весьма тривиальная история превращается в психологическую загадку: где же та грань, когда любовь и привязанность перерождаются в одержимость?
Ангельское личико, 2018
Марлин — мать-одиночка. У нее непрекращающаяся депрессия, и она всегда в состоянии алкогольного опьянения. И однажды она напрочь забывает о том, что у нее есть дочь. Девочку бросают ради случайного мужчины, и 8-летняя Элли неожиданно оказывается наедине с огромным миром и собственными страхами.
Ржавый ручей, 2018
Студентка получает приглашение на стажировку, но по дороге на интервью теряется в непроходимых лесах Кентукки. Ей придется столкнуться с безжалостными преступниками, преследованием и неожиданной помощью, которая может обернуться еще большими неприятностями. С каждым кадром сюжет делает все новые повороты, удерживая зрителей в постоянном напряжении.
Не оставляй следов, 2018
Многие из нас хотя бы раз задумывались о том, чтобы бросить все к чертям и рвануть жить в какой-нибудь домик у леса. Главный герой выбрал самый радикальный вариант эскапизма: он отказывается от всех благ цивилизации в пользу жизни в лесу под открытым небом. Его дочь вынуждена скитаться вместе с ним. После столкновения с непониманием со стороны общества им предстоит выбрать, по какому жизненному пути двигаться дальше.
Фотограф из Маутхаузена, 2018
История реального австрийского концлагеря, рассказанная с точки зрения фотографа Франсиско Боикса. В Маутхаузене он делал снимки для фашистских архивов, на которых смог запечатлеть ужасающие сцены насилия и расстрелов. Он попытается распространить фотографии с помощью друзей, но какова будет цена такого акта справедливости?
Остров, 2019
Середина XIX века. Из-за сильного шторма судно терпит кораблекрушение у берегов пустынного острова неподалеку от западного побережья Шотландии. Троим морякам удается спастись и добраться до суши, но там их ждут лишь четверо местных жителей, странных отшельников. Выжившим придется разобраться в том, что они скрывают и какова плата за их спасение.
Уилл Гарднер, 2019
По статистике, только в Америке около 6 тысяч ветеранов кончают жизнь самоубийством каждый год. А большинство тех, кто вернулся с войны, становятся изгоями общества. Лента рассказывает историю одного ветерана Ирака, который не может избавиться от кошмаров, преследующих его каждую ночь. Он хочет вернуть прежнюю жизнь и воссоединиться со своим маленьким сыном.
Побег из сумасшедшего дома: История Нелли Блай, 2018
Фильм основан на реальных событиях. Молодая девушка, потерявшая память, попадает в психиатрическую клинику на острове. При этом Нелли чувствует себя абсолютно здоровой. Однажды она крадет свой дневник из кабинета настоятельницы и находит в нем весьма неоднозначные записи. Ей предстоит вспомнить, кто она и зачем находится здесь.
Неизвестная Мэрилин, 2012
Что мы представляем себе, когда слышим имя Мэрилин Монро? Взбалмошную блондинку, вечно веселую, вечно озорную. Данное кино перевернет все ваши представления об этой женщине. Фильм основан на рассказах современников и дневниковых записях Мэрилин. На протяжении всего действа складывается чувство, будто эта удивительная актриса сама рассказывает свою историю жизни, любви и боли. Вы непременно услышите и запомните ее.
По половому признаку, 2019
Биографический фильм, основанный на истории Рут Бейдер Гинзбург. Будучи юристом, Рут боролась за равные права обоих полов в США. Она была одной из первых женщин, окончивших Гарвард, чьи знания и умения превосходили знания многих мужчин на факультете. Несмотря на горячее стремление Рут устроить свою карьеру, она продолжала оставаться любящей женой и матерью. Ей приходилось бороться на всех фронтах, чтобы отвоевать свое место под солнцем.
Сама жизнь, 2018
Молодая пара из Нью-Йорка, полная надежд на будущее, ждет ребенка, когда в их хрупкий мир врывается трагедия. Их история продолжится много лет спустя, с уже другими действующими лицами, на других континентах. Четыре новеллы, такие разные и такие трогательные, окажутся сплетены в одну захватывающую историю.
А какие фильмы из тех, что вы смотрели недавно, запомнились вам больше всего?
15 кинолент для тех, кто отчаялся найти стоящий фильм на вечер. Включайте любую — не пожалеете
Киноновинки — это здорово, но у каждого киномана наверняка есть любимые фильмы, которые он готов пересматривать снова и снова. Эти картины цепляют за душу с первых кадров, а за сюжетными поворотами и игрой актеров ты следишь с замиранием сердца и переживаешь все происходящее вместе с ними.
Мы в AdMe.ru решили сделать подборку картин с высоким рейтингом, которые просто неспособны надоесть.
1. Выживут только любовники, 2013
Фэнтезийная драма культового режиссера Джима Джармуша с Тильдой Суинтон и Томом Хиддлстоном в главных ролях. Фильм рассказывает историю вампиров Евы и Адама, живущих на Земле уже несколько столетий. Сегодня Адам — брутальный рокер из Детройта, который ненавидит современный мир и подумывает о самоубийстве. Чтобы вытащить Адама из депрессии, в Детройт прилетает его давняя возлюбленная Ева, которая живет в Марокко и обожает поэзию. Однако идиллию влюбленных разрушает внезапное появление младшей сестры Евы — безбашенной Авы. С этого момента ситуация выходит из-под контроля, а ее исход уже никто не в силах предсказать.
Чем интересен фильм: помимо ярких актерских работ, картина отличается особой медитативной атмосферой, которая заставляет зрителя полностью погрузиться в сюжет и начать проживать все события вместе с героями. Кроме того, у фильма потрясающий саундтрек.
Рейтинг IMDb: 7,4
2. Она, 2015
Криминальная драма от создателя «Основного инстинкта» Пола Верховена с Изабель Юппер в главной роли. В центре сюжета — Мишель, обеспеченная разведенная парижанка, которая владеет студией по разработке видеоигр. Однажды в ее дом проникает мужчина в маске, который грубо принуждает женщину к близости. Это событие внезапно пробуждает в ней старые психологические травмы и инстинкты, о которых она даже не подозревала. Женщина хочет сама вычислить преступника, правда, совсем не для того, чтобы сдать его полицейским.
Чем интересен фильм: сильная и дерзкая картина с нешаблонным сюжетом, оставляющая приятное послевкусие.
Рейтинг IMDb: 7,1
3. Во время грозы, 2018
Испанский триллер с элементами фантастики и лихо закрученным сюжетом посвящен популярной теме временных петель. Главная героиня Вера вместе с любимым мужем и маленькой дочкой переезжает в новый дом. Внезапно во время грозы происходит смещение временных зон, и в результате женщина получает шанс спасти жизнь мальчику, который жил в этом доме 25 лет назад. Правда, этот поступок повлек за собой цепь роковых последствий, превративших жизнь Веры в настоящий кошмар.
Чем интересен фильм: с одной стороны, картина привлекает интригующей детективной историей, а с другой — в сюжете прослеживается очень эмоциональная любовная линия.
Рейтинг IMDb: 7,4
4. Не отпускай меня, 2010
Фильм снят по одноименному роману нобелевского лауреата Кадзуо Исигуро. Трое друзей, Кэти, Томми и Рут, провели свое детство в довольно необычном интернате — они были лишены всяческого контакта с окружающим миром. Кроме того, детей постоянно отправляли на медосмотры и маниакально заботились об их здоровье. Когда герои достигли совершеннолетия, они наконец-то узнали правду о том, кто они на самом деле и в чем заключается смысл их жизни.
Чем интересен фильм: картина очень неоднозначна и поднимает действительно важные вопросы морали, нравственности и гуманизма. Также фильм привлекает сильным актерским составом: Кира Найтли, Кэри Маллиган и Эндрю Гарфилд.
Рейтинг IMDb: 7,1
5. Ева: Искусственный разум, 2011
Европейская фантастическая драма расскажет о недалеком будущем, где роботы вписаны в повседневную жизнь так же органично, как и люди. Главный герой Алекс, талантливый инженер-кибернетик, возвращается в родной город, чтобы создать совершенного андроида-ребенка. По приезде он встречается со своим родным братом Дэвидом и его женой, а также знакомится с их очаровательной дочкой Евой. Алекс и Ева сразу находят общий язык, но никто не мог предположить, чем закончится их дружба.
Чем интересен фильм: своей необычной стилистикой и красивыми пейзажами, а также глубоким философским смыслом.
Рейтинг IMDb: 6,7
6. Жасмин, 2013
Это современное прочтение классической пьесы американского драматурга Теннесси Уильямса «Трамвай „Желание“». Привычный и уютный мир главной героини Жасмин рухнул: ее брак с миллионером Хэлом распался после того, как муж признался ей в измене. Кроме того, выяснилось, что он занимался финансовыми махинациями, поэтому вскоре Хэл был отправлен в тюрьму. Раздавленная и разоренная бывшая светская львица переезжает из Нью-Йорка в Сан-Франциско, где поселяется в скромной квартирке своей сестры, которая работает продавщицей. Здесь Жасмин пытается начать новую жизнь, но кажется, что это совсем не просто.
Чем интересен фильм: «Жасмин» — одна из немногих драматических картин режиссера Вуди Аллена, который больше известен своими комедиями. Кроме того, фильм хочется пересматривать ради великолепной игры Кейт Бланшетт, которая получила «Оскар» за эту роль.
Рейтинг IMDB: 7,4
7. Искупление, 2007
В основе сюжета — популярный роман британского писателя Иэна Макьюэна. Главные роли в фильме исполнили Кира Найтли и Джеймс Макэвой. Действие картины начинается в далеком 1935 году и продолжается на фоне событий Второй мировой войны. Тринадцатилетняя Брайони обладает богатым воображением и пишет талантливые пьесы. Она знает, что у ее старшей сестры Сесилии роман с сыном прислуги — Робби. Однажды в доме происходит преступление, и маленькая Брайони обвиняет в нем любовника своей сестры. Своим поступком она бесповоротно меняет судьбы почти всех героев.
Чем интересен фильм: главным образом это история о прощении, а также о том, что бывают такие ошибки, которые невозможно исправить. Картина получила премии «Золотой глобус» и BAFTA как лучший фильм 2008 года.
Рейтинг IMDb: 7,8
8. мама!, 2017
Этот драматический триллер Даррена Аронофски породил множество споров и трактовок. Зрители и критики разделились на два лагеря: одни назвали фильм гениальным, вторые посчитали ленту странной и жуткой. В центре сюжета — пара: он — известный поэт, который страдает от творческого кризиса, она — его молодая возлюбленная. Однажды в их дом начинают приходить странные незваные гости, которые постепенно разрушают их налаженные отношения.
Чем интересен фильм: это кино из тех, которые можно бесконечно пересматривать и всякий раз находить новые скрытые смыслы. Кроме того, в картине получился очень органичный дуэт Хавьера Бардема и Дженнифер Лоуренс.
Рейтинг IMDb: 6,7
9. Зови меня своим именем, 2017
Романтическая драма от итальянца Луки Гуаданьино, основанная на одноименном романе. Действие картины разворачивается в солнечной Италии 1983 года. Элио 17 лет, он проводит свои каникулы на семейной вилле в обществе отца — американского профессора и мамы — переводчицы-итальянки. Юноша наслаждается жизнью: читает, занимается музыкой, купается и лениво флиртует с местной девушкой. Эту безмятежную идиллию нарушает приезд Оливера — молодого и красивого ассистента отца Элио.
Чем интересен фильм: картина мгновенно погружает зрителей в безмятежное итальянское лето и рассказывает трогательную историю взросления главного героя.
Рейтинг IMDb: 7,9
10. Ванильное небо, 2001
Это ремейк мелодрамы 1997 года «Открой глаза». Главный герой, Дэвид, плейбой и баловень судьбы. У него есть все: успех, богатство, бизнес, верный друг и любимая девушка. Его жизнь должна была быть прекрасной, но в один страшный день Дэвид попал в автокатастрофу и впал в кому. Очнувшись, он понял, что превратился в инвалида с изуродованным лицом. Неужели его новая жизнь — это правда, а не кошмарный сон?
Чем интересен фильм: этот фильм можно смело смотреть, даже зная, чем он закончится. Сюжет выстроен очень грамотно: он держит зрителей в напряжении до последнего кадра. Плюс в картине отличный актерский состав: Том Круз, Пенелопа Крус и Курт Рассел.
Рейтинг IMDb: 7,5
11. Облачный атлас, 2012
Масштабный проект от создателей «Матрицы» сестер Вачовски и Тома Тыквера объединил в себе 6 историй, рассказывающих о 5 невероятных реинкарнациях. Все события происходят в разное время, начиная с XIX века и заканчивая 2321 годом, но удивительным образом оказываются тесно переплетены друг с другом. Картина снята по мотивам одноименного романа Дэвида Митчелла.
Чем интересен фильм: во-первых, в ленте невероятный актерский состав — от Тома Хэнкса до Хью Гранта. Во-вторых, после «Облачного атласа» остается непередаваемое послевкусие, которое хочется сохранить как можно дольше. Наконец, этот фильм доказывает, что в мире все взаимосвязано и самое главное — соблюдать равновесие.
Рейтинг IMDb: 7,5
12. Леди Бёрд, 2017
Комедийная драма о современном мире от модного режиссера Греты Гервиг. Главная героиня Кристина учится в консервативной школе города Сакраменто. Девушка пытается найти свое место в этом мире, и кажется, что ее главная цель — быть непохожей на других. Она называет себя Леди Бёрд и красит волосы в розовый цвет. Больше всего на свете она хочет вырваться из провинции и уехать учиться в Нью-Йорк. Правда, когда ее мечта сбывается, она понимает, что ее жизнь была не так уж и плоха, а свобода — довольно абстрактная ценность.
Чем интересен фильм: это вечная история отцов и детей, немного адаптированная под современные реалии. Картина лишний раз доказывает, что невозможно убежать от себя, просто сменив место жительства.
Рейтинг IMDb: 7,4
13. Отель «Гранд Будапешт», 2014
Авантюрная комедия с элементами детектива по мотивам рассказов Стефана Цвейга от известного европейского режиссера Уэса Андерсона. Фильм расскажет об удивительных приключениях отельного консьержа Густава и его молодого друга, портье Зеро Мустафы. Однажды богатая постоялица отеля мадам Д. умирает при загадочных обстоятельствах и завещает Густаву ценнейшую картину эпохи Возрождения. Однако вскоре появляется настоящий наследник, который совсем не согласен с таким завещанием своей матери.
Чем интересен фильм: Уэс Андерсон известен прежде всего уникальной визуальной составляющей своих картин. Яркие и сочные кадры заставляют забыть об окружающей реальности и мгновенно переносят зрителей в совершенно другой мир. Кроме того, фильм можно пересматривать ради смешных диалогов и блестящей игры Рэйфа Файнса, Эдриана Броуди и Сирши Ронан.
Рейтинг IMDb: 8,1
14. Штормовой мальчик, 2019
Это австралийский приключенческий фильм, который снят по одноименной повести Колина Тиле. Главный герой Майкл Кингли, в прошлом успешный бизнесмен, а теперь пенсионер, вспоминает историю своего детства. Однажды он нашел маленьких птенцов пеликана — их маму убили браконьеры, поэтому мальчик забрал птиц себе. Вскоре они подросли, и Майкл решил отпустить пеликанов на волю. Правда, один птенец, по имени мистер Персиваль, не захотел улетать. Эта необычная дружба мальчика и пеликана оказала большое влияние на всю дальнейшую жизнь Майкла.
Чем интересен фильм: это очень добрая история о прощении и непростых человеческих взаимоотношениях, которая учит любить и заботиться о своих близких. Особым украшением картины служит игра актера Джеффри Раша.
Рейтинг IMDb: 6,9
15. Последняя любовь на Земле, 2011
Фантастическая драма с Юэном Макгрегором и Евой Грин в главных ролях. Однажды наша планета оказывается во власти страшного вируса. По всей Земле, во всех странах и городах люди начинают лишаться чувств: обоняния, зрения, слуха, вкуса. На фоне этих событий развивается страстный роман шеф-повара Майкла и эпидемиолога Сьюзен. Любовники прекрасно понимают, что мир неумолимо движется к катастрофе, и боятся даже представить, что же они будут делать, когда лишатся последних чувств.
Чем интересен фильм: это картина, после которой отчаянно хочется жить и радоваться тому, что ты можешь видеть, слышать и наслаждаться каждым мгновением. Фильм доказывает, что самое главное чувство на Земле — это любовь. Только она и остается, когда внезапно человек лишается всего.
Рейтинг IMDb: 7,1
У вас есть своя подборка фильмов, которые вы любите пересматривать? Может быть, какие-то из них перекликаются с нашим выбором?
10 шикарных современных фильмов которые вы, возможно, не видели
Порой от разнообразия киноновинок разбегаются глаза. Мы не успеваем посмотреть один фильм, как тут же выходят десятки других.
А для тех, кто пропустил премьеру и не успел посмотреть захватывающее и интересное кино, AdMe.ru составили список фильмов, которые уже успели собрать множество восторженных отзывов.
Стив Джобс
Это история жизни одного из самых выдающихся умов планеты, чье имя знакомо каждому человеку. Стив Джобс был умелым руководителем, великолепным бизнесменом и отличным предпринимателем. Все свое время он посвящал работе и трудился, не жалея сил. Но мало кто знает, через какие трудности ему пришлось пройти, прежде чем компания Apple стала мировым лидером.
Омерзительная восьмерка
США после Гражданской войны. Известный охотник за головами Джон Рут везет пойманную преступницу в Красную долину, где ее ждет казнь. По пути к ним присоединяются еще несколько путешественников, которые едут в ту же сторону. Но снежная буря вынуждает компанию прервать путь и искать укрытие в таверне, где уже собрались странные личности: мексиканец, ковбой и генерал конфедератов. И один из них не тот, за кого себя выдает.
Игра на понижение
Эта история, основанная на реальных событиях, рассказывает нам о нескольких дальнозорких парнях, которые независимо друг от друга предсказали мировой экономический кризис 2008 года задолго до того, как о нем зашептались на Уолл-стрит. И предсказав, парни начали на нем зарабатывать, сами того не желая.
Джой
Джой родилась в простой американской семье итальянского происхождения. Еще в детстве она решила, что станет счастливой и успешной, но, к сожалению, в будущем ее жизнь только усложнилась: она развелась, стала матерью-одиночкой и устроилась на малооплачиваемую работу. Однажды Джой поняла, что она сама творец своего счастья и должна добиваться успеха только своими силами. Талант и огромное желание помогли Джой пробить себе дорогу в бизнес, но перед этим ей пришлось пережить множество падений.
Экстрасенсы
Агенты ФБР сталкиваются с серией убийств, которые никак не могут объяснить. Преступник безболезненно убивает своих жертв, не отставляя никаких следов и улик. Агенты обращаются за помощью к экстрасенсу Джони Клэнси, которому предстоит вступить в неравную схватку с маньяком и найти способ загнать в ловушку того, кто всегда на 10 шагов впереди.
И грянул шторм
Сюжет фильма основан на реальных событиях, произошедших в 1952 году. Два нефтяных танкера попали в сильнейший шторм и медленно начали уходить под воду. Катастрофа казалась совсем неизбежной, так как из-за сильнейших волн моряки не смогли воспользоваться спасательными шлюпками. Но береговая охрана отправляется в эпицентр шторма, чтобы спасти утопающих. А главное, они решили провести эту операцию на небольших моторных лодках.
В активном поиске
Устав от жизни со своим бойфрендом, Элис уходит от него, переезжает к старшей сестре Мэг, находит новую работу и обзаводится новой подругой Робин. Последняя оказывается страстной поклонницей ночных «отжигов» и пытается втянуть тихоню Элис в свою безумную жизнь. Легкая романтическая комедия, которая придется по душе как мужской, так и женской аудитории.
Чемпионы: Быстрее. Выше. Сильнее
Это история о трех легендарных спортсменах, на общем счету у которых 9 золотых олимпийских медалей. У каждого был свой путь и своя уникальная драматическая история восхождения. Они стали легендами мирового спорта и дали возможность всей стране сказать: «Мы победили!»
Трамбо
Далтон Трамбо, один из самых успешных голливудских сценаристов, не подозревал, что черный список «Hollywood 10» реально существует, пока сам не попал туда и не был навсегда выкинут из жизни «фабрики грез». Через несколько лет Далтон решил снова вернуться в кино и доказать всем, что талантливого человека ничто и никто не остановит.
Мистер Холмс
Самый знаменитый в мире сыщик давно отошел от дел и проводит старость в тихой деревне, ухаживая за собственной пасекой. Однако ему по-прежнему не дают покоя воспоминания об одной женщине и ее тайне, так и оставшейся нераскрытой. Вскоре мистер Холмс решает разгадать дело, заставившее его уйти в отставку больше 30 лет назад.
15+ новых российских фильмов, в которых вы не разочаруетесь
Существует очень распространенное мнение, что российское кино — это сплошное разочарование, а вообще смотреть русские фильмы — пустая трата времени. Что сказать, определенная доля правды в этом есть: русское кино часто грешит «чернухой», плоскими шутками или излишним ура-патриотизмом и пафосом. Однако в последнее время все чаще появляются интересные исключения из правил, причем это касается не только авторского камерного кино, но и вполне массового. Кажется, что наступают времена, когда словосочетание «российское кино» больше не является синонимом плохого кино.
AdMe.ru сделал подборку отличных новых российских фильмов, которые вы могли пропустить. И очень зря.
1. Лето
Авторская картина режиссера Кирилла Серебренникова о молодом Викторе Цое и ленинградском андеграунде 80-х. «Лето» показывает историю знакомства и непростых отношений между 19-летним начинающим музыкантом Виктором Цоем, 26-летним лидером группы «Зоопарк» Майком Науменко и его женой Натальей. Черно-белый фильм с ностальгией рассказывает о зарождении советского рока и о шальной тусовке, в которой родились группы, ставшие легендами: «Зоопарк», «Кино» и «Аквариум».
Почему стоит посмотреть: Фильм получился очень атмосферным и небанальным. Изюминку придают абсурдные фрагменты, которые не связаны с реальными событиями и сняты в духе видеоклипов с оригинальной анимацией под песни Psycho Killer, The Passenger и другие хиты. Фильм полностью погружает в атмосферу жаркого летнего Ленинграда 1981 года.
2. Большой
В фильме Валерия Тодоровского рассказывается история становления одаренной балерины Юли из депрессивного шахтерского городка, которую случайно заметил ранее известный танцор балета, а ныне спившийся неудачник Потоцкий. Он прочит девочке блестящее будущее на сцене Большого театра и привозит ее в московскую балетную школу к своей бывшей наставнице Белецкой. Впереди Юлю ждут годы испытаний, разочарований и надежд. Это честная история о том, что Золушка превращается в принцессу только в сказке.
Почему стоит посмотреть: Красивый фильм с талантливыми актерами и нестандартным сюжетом. По словам актрисы, которая исполнила главную роль, это один из немногих правдивых фильмов о балете, потому что он лишен стереотипов и не повторяет расхожие штампы.
3. Петербург. Только по любви
«Петербург. Только по любви» — это 7 авторских высказываний женщин-режиссеров, в том числе Авдотьи Смирновой, Ренаты Литвиновой и Оксаны Бычковой. Каждая из них рассказывает свою историю о Петербурге, любви, людях, надежде и вере в то, что все обязательно будет хорошо. Петербург — это город, где все возможно: встретить любовь всей своей жизни, гуляя по мостовой, решиться на самую безумную авантюру, доверить свою судьбу шаману и поверить в то, что бронзовые лошади вот-вот оживут.
Почему стоит посмотреть: Легкий фильм о любви, снятый с душой. После него внутри становится хорошо и светло. А увидеть Михаила Боярского в роли шамана с бубном — бесценно.
4. Рай
Сильная драма от Андрея Кончаловского. События в фильме происходят в годы Второй мировой войны. Русская аристократка-эмигрантка Ольга в оккупированной Франции оказывается в плену у фашистов. Она помогала еврейским детям, и теперь ей грозит гибель. Она знакомится с французом Жюлем, который в обмен на близость предлагает ей помощь. Однако вскоре Ольгу отправляют в концлагерь, где она встречает офицера СС Хельмута. Он давно влюблен в нее и становится для женщины последним шансом на спасение.
Почему стоит посмотреть: Это серьезная и драматичная история не столько про холокост, сколько про русскую душу. Фильм снят необычно: в нем много реалистичных крупных планов и пронзительных диалогов. Также в фильме великолепно сыграла Юлия Высоцкая.
5. Сердце мира
В центре сюжета — история скромного ветеринара Егора, который живет и работает на тренировочной станции, куда охотники привозят своих собак. По сути, и Егор, и хозяин станции Николай Иванович со своей семьей живут в глуши — до ближайшего города нужно ехать на машине. Однако такое положение дел вполне устраивает главного героя: ему проще находить общий язык с животными, чем с людьми. С собаками, лисами и оленями ему намного спокойнее, но прошлые проблемы и трудности не оставляют его даже вдали от цивилизации.
Почему стоит посмотреть: Добрая история от автора сценария полюбившегося многим фильма «Аритмия». Кроме того, фильм характеризует очень качественная операторская работа.
6. Довлатов
Фильм Алексея Германа — младшего. В центре сюжета — несколько дней из жизни начинающего писателя Сергея Довлатова в Ленинграде 70-х. События разворачиваются на фоне скорой эмиграции друга Довлатова, поэта Иосифа Бродского. В фильме показана череда смешных и грустных событий, а также литературная жизнь Ленинграда, в которой ты можешь считаться настоящим писателем, только если тебя печатают в советских журналах.
Почему стоит посмотреть: Хорошо передана атмосфера душного времени, где нет места талантливому человеку, а побеждает лишь посредственность. Хороший актерский состав: Данила Козловский, Светлана Ходченкова, Елена Лядова. Ну и конечно, сербский актер Милан Марич в роли Довлатова выглядит весьма убедительно.
7. Ампир V
Долгожданная экранизация романа Виктора Пелевина Empire V скоро должна выйти в широкий прокат. История о юном грузчике Роме, который после укуса превращается в вампира Раму II. Но чтобы стать вампиром, недостаточно быть избранным, нужно учиться. Вот только науки у избранных совсем другие – важно овладеть искусством управления человечеством.
Почему стоит посмотреть: Один из самых загадочных и ожидаемых фильмов еще с 2017 года. Главные роли исполнили Павел Табаков и Мирон Федоров, больше известный как рэпер Оxxxymiron.
8. Движение вверх
Спортивная драма, которую еще называют «настоящим блокбастером о баскетболе», снята по мотивам реальных событий, когда сборная СССР победила сборную США в финальном матче мужского баскетбольного турнира XX Олимпийских игр в Мюнхене 1972 года. До этого 36 лет сборная США была непобедимой. Это самый кассовый отечественный фильм в истории современного российского кинопроката.
Почему стоит посмотреть: Качественно снятая спортивная драма, за героями которой интересно наблюдать. Хотя на самом деле фильм совсем не про баскетбол. Скорее, «Движение вверх» напоминает нам о том, что добро порождает добро и что в жизни всегда есть место чуду.
9. Кислота
Москва, наши дни. 20-летние музыканты Саша и Петя находятся в поиске себя и своего места в жизни. Они живут ярко и легко на деньги родителей: тусуются, прожигают жизнь, пытаясь найти хоть какой-то баланс и почву под ногами. За видимостью беззаботной жизни молодые люди прячут разрушительное чувство одиночества. Однажды в их жизни случается событие, которое заставляет посмотреть на себя со стороны и многое переосмыслить.
Почему стоит посмотреть: Дебютная работа актера «Гоголь-центра» Александра Горчилина в качестве режиссера. Ему хорошо удалось показать проблемы и надежды современных молодых людей. Кроме того, фильм напоминает нам, что главное в любых отношениях — это любовь.
10. Про любовь. Только для взрослых
Главная тема фильма, конечно, любовь. События происходят в летней Москве. Фильм разделен на несколько новелл, объединенных в рамках одной лекции: «Как найти и сохранить любовь в большом городе». Герои — самые обычные люди: девушка-полицейский, известный актер, богатая дама, девочка-подросток, но все они хотят одного: любить и быть любимыми.
Каждому из них предстоит пройти свой непростой путь в поисках настоящего счастья.
Почему стоит посмотреть: Это не просто банальное кино про любовь, а экранизированное «сегодня» со всеми приметами, переживаниями и проблемами нашего времени. Плюс очень радует диапазон актеров — от Джона Малковича до Анны Михалковой.
11. История одного назначения
Киноповесть Авдотьи Смирновой про то, как молодой граф Лев Толстой защищал несправедливо осужденного военного писаря, который был приговорен к смертной казни. События, изложенные в фильме, происходили в реальности — писатель вызвался быть адвокатом обвиняемого в суде и произнес блестящую речь.
Почему стоит посмотреть: Кроме отличной актерской игры картина примечательна важным посылом: рассказывая историю из позапрошлого века, она напрямую говорит со зрителем о сегодняшнем дне. Это по-настоящему важный и злободневный фильм.
12. Анна Каренина. История Вронского
Авторский взгляд на классику от Карена Шахназарова — без линии Левина и Кити, но с Русско-японской войной. Повествование начинается с того, что начальник военного госпиталя в Маньчжурии Сергей Каренин узнает в раненом офицере того самого графа Вронского, из-за которого его мать, Анна Каренина, бросилась под поезд. Взрослый сын Анны на протяжении всего фильма пытается найти для себя ответ на терзающий его вопрос: что заставило ее тогда переступить черту? Алексей Вронский рассказывает Каренину-младшему свою версию событий, попутно переосмысливая все, что произошло много лет назад.
Почему стоит посмотреть: В этом фильме все актеры на своих местах: Елизавета Боярская в роли Карениной, Максим Матвеев в роли Вронского, Виталий Кищенко в роли Каренина. Кроме того, необычная интерпретация расставила новые акценты во всем известной истории.
13. Теснота
Дебютная драма молодого режиссера Кантемира Балагова, снятая при поддержке фонда Александра Сокурова. Сюжет основан на реальной истории, которая произошла в Нальчике во время чеченской войны в 1998 году. В центре сюжета — история интеллигентной еврейской семьи, где случается горе: кто-то похищает их младшего сына с его невестой и требует огромный выкуп. Родителям приходится продать свой маленький бизнес, но денег на выкуп все равно не хватает, и они просят помощи у еврейской общины. Однако оказывается, что помочь семье может только их старшая дочь Илана, которая готова пойти ради брата на любые жертвы.
Почему стоит посмотреть: Фильм, по словам режиссера, «охватывает все понятия тесноты», в том числе «эгоизм и тесноту традиций, внутренних рамок и менталитетов». Это очень своевременное и актуальное кино.
14. Человек, который удивил всех
Главный герой Егор Коршунов – егерь из сибирской деревни. Он примерный муж и отец, хороший работник и вообще достойный человек. Однажды Егор узнает, что неизлечимо болен и жить ему осталось пару месяцев. Традиционная медицина и местные шаманы оказываются бессильны, но Егор не собирается сдаваться. Тогда он решает полностью изменить свою личность, став буквально другим человеком, чтобы обмануть смерть, как это сделал герой древнего сибирского эпоса.
Почему стоит посмотреть: Оригинальная и глубокая история, которая заставляет задуматься о жизни и о себе. Кроме того, в фильме можно увидеть Евгения Цыганова в совершенно необычном амплуа.
15. Купи меня
В центре фильма — история студентки филфака Кати, которой выпадает шанс пройти стажировку в Париже. Однако жажда приключений оказывается сильнее, поэтому вместо научной работы она выбирает карьеру модели и уезжает в Дубай. Правда, оказавшись в Арабских Эмиратах, Катя понимает, что ее привезли туда не в качестве модели, а в качестве работницы эскорта. В Эмиратах она знакомится с еще двумя девушками, которые так же, как и она, стремятся к роскоши и достижению цели. Правда, цели у всех разные, и подруги даже не задумываются, чем иногда приходится пожертвовать, чтобы достичь желаемого.
Почему стоит посмотреть: На первый взгляд это гротескная история о красивых девушках, которые всеми силами прокладывают себе дорогу в мир роскоши. Но на самом деле это ироничная и немного циничная комедия с удачными шутками про современное общество и искусственные ценности
Экс-главред AdMe Ксения Лукичева стала креативным директором ivi.ru
Экс-главред AdMe Ксения Лукичева стала креативным директором ivi.ru
Юлия Судакова
Бывший главный редактор издания Adme Ксения Лукичева получила должность креативного директора онлайн-кинотеатра ivi.ru.
Фото: Facebook
О причинах, побудивших Лукичеву остановить выбор именно на ivi.ru, она написала в Faceboоk.
«Выбирала как та девочка из анекдота: «Все такое вкусное». Но эти граждане подкупили меня двойственностью задач, — написала новый креативный директор. — С одной стороны я буду делать то, что вроде как умею. А с другой — то, что вообще еще никто не умеет, ну чтоб не расслаблялась, а то ишь. Весело и страшно, все как я люблю».
В задачи Ксении будет входить работа над медиа о кино Титр и развитие каналов персонализированного телевидения ivi tv, говорится в полученном RB.ru пресс-релизе.
«Грандиозные планы в новой должности следующие: с командой Титра сделать из него самое крутое медиа про кино и сериалы, не заходя при этом на информационное поле основных киноресурсов, то есть такой инфотейнмент про кино; с командой ivi tv — вывести персональное телевидение на новый уровень контакта с аудиторией», — рассказала Лукичева о своих планах на новой должности.
Напомним, на протяжении предыдущих восьми с половиной лет Ксения Лукичева работала главным редактором в информационном издании adme.ru, ставшим одним из самых популярных сайтов Рунета. Лукичева является выпускницей факультета журналистики Казанского государственного университета (окончила его с отличием), читает лекции, совмещающие накопленный ею опыт работы и теорию психологии, нейробиологии и философии.
ivi — российская медиакомпания, развивающая онлайн-проекты с легальным профессиональным видеоконтентом. Компания основана в 2007 году Олегом Тумановым. В 2014 году совокупное количество просмотров видео на платформах доступа ivi составило почти 2,2 млрд, и по итогам 2014 года компания вошла в топ-50 самых быстро развивающихся стартапов в Европе. ivi активно развивает ряд проектов, среди которых — новостной портал Титр и персонализированное телевидение ivi tv.
40 цитат от короля сарказма — доктора Хауса
Все люди врут.
Этой осенью исполняется 10 лет с момента выхода первой серии сериала «Доктор Хаус». Это была настоящая бомба. Дико харизматичный Хаус не оставил равнодушных: кто-то его терпеть не мог за прямоту и наплевательское отношение к окружающим, а кто-то пришел в неописуемый восторг от мастерского сарказма и великолепного ума героя.
По такому случаю AdMe.ru и подготовил для вас 40 примеров отборного сарказма неподражаемого доктора Хауса.
fabuloussavers.com |
- Здравствуйте, меня зовут доктор Хаус! И давно вы уже психопатка?
- Вы всегда так глупы или сегодня особый случай?
- Игнорируете меня? Или молча наслаждаетесь моим обаянием?
- Вы немного полноваты. Под словом «немного» я подразумеваю, что вы разъелись до полусмерти.
- Соболезную. Жить он будет долго и достанет вас по полной.
- Мне пора… куча больных. Вот потороплюсь… и может, удастся их избежать.
- Совесть? Это ты про ту штуку, которая дает о себе знать, когда нет логичных причин вести себя так, как от тебя требуют?
- Пациент умер? Или мне надо работать?
dr-house.xooit.tv |
- Я хотел бы вам ударить в зубы, но почему я должен улучшать ваш внешний вид?
- Хорошо быть взрослым. Никому ничего не должен.
- У всех детей есть одна общая черта — они все кретины.
- У Вас повреждён мозг… Вы обречены на пожизненное счастье.
- Врать родителям — это, конечно, правильно, но перед лицом смерти можно и отступить.
- Я прав или… я прав?
- Ты же давал клятву быть крутым? По крайне мере я такую давал, пока все давали клятву Гиппократа.
- У тебя 2 варианта. Ещё поспорить и сделать, что я сказал или сделать, что я сказал.
- Неужели это волчанка? Мечты сбылись!
livelib.ru |
Чейз: Ей осталось всего 2-3 месяца.
Хаус: Есть и хорошая новость: это значит, что я опять прав.
Хаус: Миссис Адамс, не могли бы вы выйти на минуту?
Миссис Адамс: Зачем?
Хаус: Затем, что вы меня раздражаете.
Чейз: Вы шутите!
Хаус: Ну, это не трудно… Что может быть смешнее рака?
Уилсон: Черт, пациентка с терминальной стадией почечной недостаточности. Сердце не выдерживает диализа, нужна трансплантация, а… Когда разговор не о тебе, ты отключаешься, так?
Хаус: Что?
Уилсон: Эта женщина…
Хаус: Та, что не говорит? Мне понравилась.
Уилсон: Хватит менять тему!
Хаус: Сказал любитель менять тему.
Уилсон: Хаус, какого черта твой нестабильный пациент разгуливает по коридору?
Хаус: Порвал поводок.
fanpop.com |
Начальник тюрьмы: Ваш пациент пырнул ножом своего сокамерника, другому сломал шею, чуть не обезглавил одного из охранников.
Хаус: Не бойтесь, я его не обижу.
Уилсон: Если ты хотел поработать в одиночестве, мог бы просто сказать. Зачем врать?
Хаус: Врать интереснее.
Тринадцать: Друзья уважают решения друг друга, даже если не согласны с ними. Это называется преданность.
Хаус: Преданность — способ заставить поступить кого-то так, как тебе нужно.
Мать пациента: Как вы можете просто сидеть здесь?
Хаус: Если я буду есть стоя, я подавлюсь.
Форман: Он, возможно, просто пошевелился, никто не остается идеально неподвижным во время томографии.
Хаус: Да, возможно, ему было неудобно, и он передвинул одно полушарие своего мозга в более удобное положение.
Пациент: Это хорошая больница?
Хаус: Смотря что вы имеете в виду под словом «хорошая». Кресла у них удобные.
Кадди: Обрати на меня внимание!
Хаус: Прости, но тогда мне будет сложнее тебя игнорировать.
serial-house.ru |
— Извините, доктор Хаус, я работаю вместе с Венди Ли, а еще я ее парень.
— Супер, а я тот, кому плевать.
— Вы не видели мой деревянный ящик?
— Какой ящик?
— Деревянный, в форме ящика.
— Помоги мне избежать этого ужина, и я расскажу, кто пустил слух, что ты транссексуал!
— Нет такого слуха!
— Будет, если не поможешь избежать ужина!
— Как вы проверите реакцию кого-либо на боль?
— Просто. Сделаю им больно.
funnyjunk.com |
— Я два часа прождал в холле.
— Увлекательно. Мемуары писать не думали?
— Думаешь, я хочу, чтобы весь мир видел, как ты пялишься на мою задницу и критикуешь мой гардероб?
— А было бы лучше если бы я пялился на твой гардероб и критиковал твою задницу?
— Нужен адвокат!
— Вы кого-то убили?
— Никого. Но еще не вечер.
FAFDrugs4 Домашний
Дорожная карта для
FAFDrugs4
Август 2017 — Полная переработка общего алгоритма FAF-Drugs4 для обеспечения возможности многопроцессорных вычислений и ускорения вычислений.
Биоинформатика 2017 Август в печати Lagorce D. et al- Апрель 2016 г. — Значительный пересмотр определений SMARTS для повышения чувствительности / селективности обнаружения токсикофоров.
- Июль 2015 — Обновление FAFDrugs2 до веб-сервера FAFDrugs3 — пересмотр алгоритма этапов обработки входных данных:
• Улучшенное обнаружение и устранение крупных соединений, изотопов и неорганических веществ.
• Оптимизация этапа обессоливания, на котором теперь используются определения SMARTS 211 известных и использованных солей.
• Совершенствование процедуры нейтрализации-стандартизации / нормализации (теперь при обнаружении дубликатов учитывается стереохимия).
• Существенное уточнение процедуры протонирования для расчета оптимальных дескрипторов (например, HBD, HBA, зарядов …) с использованием метода Chemaxon cxcalc и выбора основного микровида при pH 7,4 (необходимо для расчетов logD).
Nucleic Acids Res. 1 июля 2015 г .; 43 Lagorce D. et al. - Сентябрь 2014 г. — Значительные улучшения в отношении правил и обнаружения токсикофора.
• Новые функции фильтрации:
— Пользователь может выбрать два новых предварительно определенных фильтра (подобный лекарству и подобный свинцу), диапазоны которых были определены после анализа значений Physchem для пероральных одобренных лекарств.
— Оптимизация SMARTS для 154 структурных предупреждений после анализа основных публикаций о токсичности лекарств (см. Раздел о токсикофорах).
— Теперь доступен PPi-HitProfiler (Sperandio O. et al) (только 3D соединения).• Новые правила и диаграммы для индивидуального анализа каждого соединения:
— Внедрение инструментария Eli-Lilly MedChem Rules ([53]). Этот инструмент помогает отмечать потенциально реактивные или неразборчивые соединения. Этот пакет используется E Lilly для открытых проектов по поиску лекарств.
— Модель токсичности фосфолипидозы, основанная на структурных особенностях ([69]).
— Правила физхема Pfizer 3/75 [54] и GSK 4/400 [26].
— Радиолокационная диаграмма сложности (Fsp3 [39], Гибкость, системные кольца, Стереоцентры, вращающиеся связи, жесткие связи)
— Радиолокационная диаграмма, отображающая расположение соединения в диапазонах примененных фильтров (по умолчанию — как лекарство) 2011 — Запуск веб-сервера FAFDrugs2.FAFDrugs2 доступен через портал Mobyle, размещенный
Платформа RPBS.
Bioinformatics 2011 Jul 15; 27 (14): 2018-20 Lagorce D. et al - 2009-2011 — Несколько улучшений, посвященных версии веб-сервера.
— BankFormatter форматирует входной файл пользователя в соответствующий файл SDF, необходимый для FAFDrugs2.
— Редактор фильтров позволяет пользователю создавать свой собственный фильтр Physchem.
— Улучшение удаления дубликатов и смесей.
— Улучшение вычислений LogP с помощью XLOGP3 за счет использования экспериментальных значений LogP из базы данных PHYSPROP.
— Встраивание ChemAxon Standardizer для нормализации библиотеки соединений перед обработкой.
— Добавлены новые правила Physchem (сложность, LogSw, оценки биодоступности при пероральном приеме …)
— Удобная для пользователя страница результатов в формате html с различными графическими отчетами (радарные графики, двухмерное изображение молекул …)
— Точная оптимизация шаблонов SMARTS, связанных с токсикофорами обнаружение.
— Тесное сотрудничество с доктором Дж. Баэллом для реализации функции обнаружения БОЛИ (по результатам тестов WEHI). - Сентябрь 2008 г. — Выпуск автономной версии FAFDrugs2. Утилита командной строки Python
на основе химического инструментария с открытым исходным кодом OpenBabel, которая выполняет различные физико-химические вычисления (23 физико-химических правила), определяет ключевые функциональные группы, некоторые токсичные и нестабильные молекулы / функциональные группы (более 200).
BMC Bioinformatics 2008 24 сентября; 9: 396 Лагорс Д. и др.Получите FAFDrugs2 автономную версию.
- июль 2006 — Разработка и развертывание FAFDrugs на платформе RPBS
FAF-Drugs — это онлайн-сервис, основанный на Frowns (инструментарий химиоинформатики), который позволяет пользователям обрабатывать свои собственные коллекции соединений (вводимые файлы SMILES, CANSMILES и SDF ) с помощью простых правил фильтрации ADME / Tox, таких как молекулярная масса, площадь полярной поверхности, logP или количество вращающихся связей.
Nucleic Acids Res. 34 (проблема с веб-сервером): W738-44. Митева М.А. и др.
»» »» Краткое обучающее видео
MT i
спасибо
INSERM ,
Парижский университет Дидро ,
ANR и
INCa для опор и
Chemaxon за предоставление пакета JChem
Масс-спектрометрия с акустическим выбросом для высокопроизводительного анализа
Масса является фундаментальной молекулярной характеристикой, и появление масс-спектрометрии (МС) для ее измерения оказало глубокое влияние на науку.В последнее время масс-спектрометры стали обычным явлением из-за их коммерческой доступности, прочности и удобного интерфейса, предлагая при этом изысканные возможности. Современные инструменты могут регулярно измерять массу с высокой точностью (> PPM) и высокой скоростью (<0,1 с), несмотря на то, что требуются минимальные объемы образцов (
Хотя MS добилась огромных успехов, ограничения остаются. Эффективная и воспроизводимая доставка образца в прибор — ключевой элемент успешного экспериментального МС-анализа. Для водных образцов для введения образца обычно используется жидкостная хроматография (ЖХ) после некоторого уровня обработки образца.Хотя этот подход доказал свою эффективность, он не полностью дополняет МС, поскольку ЖХ и МС несовместимы с точки зрения пропускной способности и требований к образцам. Это не ограничение в таких случаях, как нецелевые аналитические эксперименты, когда необходимо профилировать широкий спектр аналитов (например, протеомика). Однако для целевого анализа использование ЖХ сильно ограничивает пропускную способность и производительность МС. Это зависит как от времени, необходимого (для подготовки и анализа образцов), так и, что, возможно, более важно, от сложности из-за экспертных знаний, необходимых для эффективного поддержания и оптимизации ЖХ-аспекта эксперимента.Предоставление более быстрой и простой альтернативы ЖХ значительно расширит влияние и применение МС на дополнительные науки, основанные на измерениях.
Биоаналитические технологии, обычно используемые для анализа жидких проб, включают радиометрические подходы ( 3 ), оптические подходы, такие как флуоресцентная спектроскопия ( 4, 5 ), и массовые подходы, включая ЖХ-МС ( 6–8 ) , МС с лазерной десорбцией / ионизацией с использованием матрицы (MALDI-MS) ( 9–11 ) и МС с твердофазной экстракцией (SPE-MS) ( 12–14 ).Что касается доставки образцов на акустической основе, ранние попытки были сосредоточены на подходах с ионизацией акустическим туманом (AMI-MS) ( 15, 16 ). AMI-MS использует акустический преобразователь для создания облака заряженных капель фемтолитрового объема посредством импульсного выброса с ионизацией окружающей среды и прямого введения в МС через нагретую передающую трубку. Этот подход может быть послушным, но рутинное применение потребует преодоления основных ограничений и препятствий.
В этой работе мы описываем новый подход к доставке образцов, который революционизирует доступ к MS и их использование.Подход сочетает в себе технологии, которые являются синергетическими для производительности МС: акустический выброс капель (ADE) и интерфейс с открытым портом (OPI) ( 17 ). Технология ADE позволяет точно и точно отбирать объемы нл в масштабе времени в герцах, и, в частности, датчик ADE визуализирует образцы напрямую, так что обработка не требуется. OPI обеспечивает элегантный, минималистичный подход к вводу пробы в МС. В OPI растворитель непрерывно течет через коаксиальную трубку с постоянной скоростью, что позволяет разбавлять образцы в режиме онлайн.В случае образца nL от ADE легко достичь> 1000-кратных разведений; эта функция почти исключает подавление ионов, которое необходимо контролировать для успешного анализа ESI-MS (ключевой фактор использования ЖХ в традиционных подходах). Подход бесконтактного переноса ADE-OPI сводит к минимуму артефакты уноса, которые могут мешать методам ЖХ, поскольку образцы вводятся акустически с последующим сильным разбавлением потоком растворителя OPI. Кроме того, оптимизировать элемент анализа ADE-OPI несложно; следовательно, анализ образцов с помощью ESI-MS значительно упрощается, а также становится более надежным.В этом отчете мы подробно описываем прибор и характеризуем его основные аналитические характеристики. Кроме того, мы подчеркиваем его эффективность в различных приложениях, от анализа химических реакций до биологического анализа in vivo и in vitro, путем сравнения традиционных подходов и подходов ADE-OPI-MS. Продемонстрированный прирост производительности и полезности должен привести к трансформационному расширению МС в качестве считывающего устройства для количественных наук, основанных на измерениях.
OPI продемонстрировал большой потенциал в качестве надежного метода доставки образцов для ESI-MS ( 18 ) анализа нескольких типов сложных образцов, включая полимеры, чернила, масла и ткани, ( 17, 19, 20-22 ). Кроме того, OPI использовался в качестве интерфейса прямого отбора проб для твердофазной микроэкстракции (SPME) ESI-MS ( 20, 21 ). OPI использует выровненные по вертикали коаксиальные трубы для доставки растворителя через кольцевое пространство трубы к порту захвата, где образуется вихрь.Для подхода ADE-OPI-MS мы интегрируем технологию ADE с OPI, так что капли доставляются в одно положение (перевернутый OPI), а транспортная жидкость вводит образец в детектор (рис. 1A и S1). Более конкретно, перевернутый OPI выравнивается над лункой микропланшета для захвата нанолитровых образцов ADE. Здесь объем капли точно регулируется независимо от состава матрицы образца (рис. S2). Ширина пика на последующем графике зависимости массы от реакции является функцией разбавления, диспергирования и перемешивания капель, которые распространяют образец внутри переносящего капилляра, когда он конвективно транспортируется к источнику ESI (рис.1А). Дисперсия в переносящем капилляре обычно ограничивает частоту отбора проб, поскольку пики образца диффундируют в растворитель-носитель и расширяются за время транспортировки, в конечном итоге сливаясь. На рис. 1B показаны типичные аналитические кривые, полученные при частоте дискретизации 2 Гц [ширина пика базовой линии 0,5 секунды, CV 2,5%. Более высокие частоты дискретизации возможны при мультиплексировании (рис. S3)]. При такой скорости производительность ADE-OPI-MS позволяет обрабатывать от 50 000 до 100 000 образцов в день, исходя из стандартного 16-часового времени автономной работы и скорости анализа (1-2 Гц).Использование ESI-MS обеспечивает превосходные количественные характеристики с точки зрения чувствительности, воспроизводимости и линейного динамического диапазона без переходящего остатка и применимо к широкому спектру аналитов (рис. S4-S6). Взятые вместе, очевидно, что подход ADE-OPI-MS обеспечивает резкое увеличение объема анализа проб при сохранении или, возможно, улучшении аналитических характеристик традиционных подходов.
Рис. 1.
(A) Схема системы ADE-OPI-MS. Импульс акустической энергии выбрасывает капли образца (2.5 нл) вверх со скоростью 1 метр / секунду в перевернутый OPI. Гидравлический насос подает растворитель-носитель (300 мкл / мин) в область захвата образца, которая имеет стабилизированную потоком поверхность раздела вихрей; образец улавливается и разбавляется вихревой струей текущего растворителя-носителя. Источник высокого напряжения (ВН) и распыляющий газ (азот) в капилляре распылителя приводят в действие обычный ESI.
Рис. 1.
(B) Демонстрация частоты дискретизации 2 Гц с чистым ацетонитрилом в качестве растворителя-носителя (600 мкл / мин). Каждая инъекция состоит из 5 нл 100 нМ декстрометорфана в воде.Средняя полуширина на полувысоте (FWHM) составляет 0,21 с, CV площади необработанного пика составляет 2,5%.
Чтобы продемонстрировать эффективность ADE-OPI-MS как количественного ридера для подходов, основанных на измерениях, мы сначала оценим переносимость матрицы с образцами плазмы человека (рис. 2). Плазма состоит из сложной матрицы, которая может существенно повлиять на аналитические измерения; действительно, в настоящее время прямой анализ образцов плазмы с помощью ESI-MS невозможен. Как правило, успешный анализ пробы плазмы включает оптимизацию и выполнение трудоемких и трудоемких операций по очистке пробы и разделению методом ЖХ.Используя подход ADE-OPI-MS, мы протестировали наборы образцов, полученные с помощью стандартного осаждения белка (Группа 1) и 3 простых условий (Группы 2, 3 и 4). Образцы плазмы, полученные простым разбавлением 1: 1 водой и водой, содержащей 0,1% муравьиной кислоты (об. / Об.) (Группы 2 и 3, соответственно), не показали значительных различий по сравнению с образцами, подвергнутыми осаждению белка (группа 1) в отношении симметрии формы пика и чувствительности. Среди этих трех групп образцы, разбавленные водой, содержащей 0.1% муравьиная кислота (об. / Об.) (Группа 2) обеспечивает оптимальные результаты количественного определения (для точности и линейности стандартной кривой). Образцы чистой плазмы (например, необработанные; Группа 4) также анализировали непосредственно с помощью ADE-OPI-MS; здесь наблюдалась умеренная потеря сигнала (<2X) по сравнению с образцами, разбавленными 1: 1 или осажденными белками. Для всех групп лечения эти результаты были получены без использования внутреннего стандарта и показывают, что платформа ADE-OPI-MS обладает высокой толерантностью к сложным матрицам из-за нанолитрового объема вводимого образца, а также разбавления, осуществляемого в OPI.[Демонстрация толерантности матрицы с моющим средством подробно описана в дополнительной информации (рис. S5).] В этом примере ADE-OPI-MS обеспечивает значительное улучшение по сравнению с традиционными подходами в двух измерениях: 1) простота и эффективность работы за счет почти полного исключения пробоподготовки и 2) скорость анализа. Другим ключевым преимуществом ADE-OPI-MS является бережное отношение к образцам: требуемый минимальный объем образца и исключение этапов подготовки, разрушающих образец, позволяют уменьшить объем отбора образцов плазмы с соответствующим сохранением образцов, так что исходные, неизмененные образцы могут быть повторно проанализированы повторно в более поздние сроки.
Рис. 2.
Матричные тесты на переносимость: образцы стандартной кривой верапамила, обнаруженные непосредственно с помощью ADE-OPI-MS. Были приготовлены четыре набора стандартов верапамила в объединенной плазме человека с конечными концентрациями каждого образца в диапазоне 20 нМ — 20 мкМ. Образцы группы 1 были подвергнуты стандартным стадиям осаждения белка и центрифугирования; Образцы группы 2 смешивали с равными объемами воды, содержащей 0,1% муравьиной кислоты; Образцы 3-й группы смешивали с равными объемами воды; Образцы 4-й группы находились в чистой плазме (т.е.г., необработанный). Все образцы вводили в трех экземплярах. (A) Необработанные следы MS; (B) стандартные кривые, полученные для каждого из четырех условий.
Оценка кинетики ферментативной реакции может иметь решающее значение для понимания биологических и химических процессов. Например, кинетические параметры фармакологического анализа (например, концентрация фермента / субстрата, время инкубации и т. Д.) Должны быть определены как предварительное условие для создания надежных анализов. В традиционных подходах к таким анализам используются фотометрические технологии, в частности флюоресцентные считыватели планшетов.Они обеспечивают высокую пропускную способность, но ограничены динамическим диапазоном (обычно менее 2 порядков), а для обнаружения часто требуется использование специальных датчиков, которые могут вносить экспериментальные артефакты. MS-обнаружение представляет собой универсальный метод без этикеток с высокой чувствительностью и широким динамическим диапазоном (обычно 3-4 порядка). Однако обычный ЖХ-МС ограничен временем анализа и этапами обработки образца, что делает его непрактичным для интенсивных кинетических исследований в реальном времени. Характеристики производительности ADE-OPI-MS обеспечивают возможность измерения кинетики в реальном времени на месте, преодолевая проблемы фотометрических подходов и подходов ЖХ-МС, позволяя отбор проб со скоростью фотометрического считывателя, широкий динамический диапазон (3-4 порядка величина), допуск для сложных матриц образцов без очистки образца и низкий расход образцов.Чтобы изучить кинетическое применение, мы провели биохимический эксперимент для измерения in situ кинетического метаболизма декстрометорфана (ДХМ) субстрата CYP2D6 с помощью микросом печени человека (HLM). Как истощение субстрата (DXM), так и образование метаболита декстрорфана (DXO) отслеживали в течение 30-минутной реакции (рис. 3A). При каждом отборе пробы одна капля объемом 2,5 нл выбрасывалась из 40 мкл реакционного объема лунки микропланшета, оставляя основной реакционный объем практически неизменным.Повторный отбор проб из одной и той же скважины устраняет изменчивость от лунки к лунке и повышает воспроизводимость по сравнению с традиционными методами, в которых требуется несколько повторов для усреднения изменчивости данных. Примечательно, что неочищенные образцы реакции (содержащие высокие концентрации как белка, так и соли) вводили непосредственно в платформу ADE-OPI-MS без изменения образца или этапов очистки. Площади пиков ДХМ для всех лунок за полный период времени дали линейные графики для 6 различных концентраций (Рис.3B), демонстрируя, что технология ADE-OPI-MS обеспечивает как количественные, так и высокоточные данные. Точно так же образование DXO линейно увеличивалось со временем для каждой из концентраций субстрата (фиг. 3C). Полученные скорости реакции были впоследствии адаптированы к модели Михаэлиса-Ментен для определения K m для метаболизма DXM в DXO CYP2D6 в HLM (рис. 3D). При 3,79 мкМ этот K m находится в пределах заявленного диапазона 2,5-15,2 мкМ для CYP2D6-опосредованного метаболизма DXM ( 23 ).Эти высококачественные результаты, охватывающие 456 точек данных (количественное измерение как истощения субстрата, так и образования продукта; большое количество образцов), были получены одним аналитиком за 28 минут.
Рис. 3.
Демонстрация мониторинга кинетики на месте с помощью платформы ADE-OPI-MS. (A) График времени ADE-OPI-MS для ферментативной реакции CYP2D6, показывающий оставшийся субстрат декстрометорфан (DXM) и метаболит O-деметилирования декстрорфан (DXO). Каждый образец отражает 6 концентраций декстрометорфана в двух экземплярах.(B) Расширенный вид, показывающий два набора пиков 12 субстрата DXM (вверху) и соответствующих пиков продукта DXO (внизу) на начальной стадии реакции (~ 4 мин в реакцию, с небольшим оборотом субстрата DXM из-за низкой реактивности при комнатная температура). (C) График площадей пиков для образования продукта метаболита (DXO) для диапазона концентраций субстрата DXM, измеренных в течение 30 минут реакции. Все шесть участков вернули 2 рэндов> 0,99. (D) Подгонка Михаэлиса-Ментен скорости образования.Показан Km для метаболизма DXM в DXO с помощью CYP2D6 в HLM.
Платформа ADE-OPI-MS хорошо подходит для фармакологических приложений с большим количеством образцов. Ацилтрансфераза использовалась в качестве модельного фермента, чтобы продемонстрировать потенциальную полезность этой платформы для поддержки типичных фармакологических анализов высокопроизводительного скрининга (HTS). Фиг.4 представляет собой пример анализа активности ацилтрансферазы с кинетическим считыванием; Скорости реакции определяли из этого набора образцов с помощью ADE-OPI-MS и сравнивали с традиционным методом на основе планшет-ридера, использующим дериватизацию с коммерческим набором CoA Green (рис.4G). Для анализов с использованием высоких концентраций (> 4 мкМ) субстрата ацил-КоА аналогичные профили ингибирования наблюдались с использованием обеих методик. Однако при более низких концентрациях субстрата (0,1-4 мкМ) ADE-OPI-MS смог точно измерить истощение субстрата (см. Область ниже 1 мкМ), в то время как устройство для чтения планшетов показало ложную скорость образования из-за дополнительного времени ( 15 минут в соответствии с протоколом анализа), необходимое для связывания реагента CoA для обнаружения (рис. 4G). Эти результаты демонстрируют, что традиционные подходы на основе планшет-ридеров, требующие связанных флуоресцентных зондов, склонны к появлению артефактов и могут быть не в состоянии определить истинную кинетику фермента из-за искажающей кинетики реакции связывания.Платформа ADE-OPI-MS обеспечивает преимущества детектирования МС без этикеток, при этом согласовывая скорость отбора проб с планшет-ридера. Примечательно, что платформа ADE-OPI-MS может одновременно обнаруживать несколько аналитов или химических веществ, что продемонстрировано здесь для анализа как субстрата, так и продукта. Это невозможно с помощью обычных планшет-ридеров, для которых необходимо разработать специальные реагенты для маркировки, а мультиплексирование может быть ограничено из-за специфичности и возможных помех между метками. Применение этой технологии в другом фармакологическом анализе HTS (анализ активности транспортера холина, рис.S8 и таблица S2), а также анализы ADME (анализ ингибирования лекарственное средство-лекарственное средство CYP, рис. S7 и таблица S1) описаны в дополнительной информации.
Рис. 4.
Кинетическое считывание анализа активности ацилтрансферазы. Было приготовлено 108 образцов с использованием 5 нМ фермента ацилтрансферазы, 5 мМ глицеральдегид-3-фосфатного (G3P) субстрата и различных концентраций кофактора (ацил-КоА). Образование продукта фосфатидной кислоты из 108 образцов контролировали повторно, 9 раз в течение 36 минут (D), а также концентрацию субстрата G3P (A).Увеличенные изображения (B и E) одного из девяти показаний показывают 12 групп образцов, каждая с различной концентрацией ацил-КоА (в диапазоне от 250 мкМ до 0,1 мкМ с 2-кратным ступенчатым разбавлением). Дальнейшие увеличенные изображения (C и F) 9 образцов, обработанных в трех экземплярах, с той же концентрацией ацил-CoA 4 мкМ, но с ферментом / кофактором и без него (см. Этикетку на вставке). G. Сравнение скоростей реакций, полученных из анализов флуоресценции (BioVision Co-A # K367-100) и ADE-OPI-MS (фосфатидная кислота).
Платформа ADE-OPI-MS совместима с любым типом масс-спектрометра, который используется в традиционной ЖХ-МС.В дополнение к показанному выше трехчетверному прибору с единичным разрешением, оптимизированному для целевых задач количественного анализа, мы также интегрировали времяпролетный (TOF) прибор с высоким разрешением (HR) в систему ADE-OPI-MS для создания Вариант HR (ADE-OPI-HRMS). При работе в режиме полного массового профилирования ADE-OPI-HRMS становится считывающим устройством с высокой пропускной способностью и высоким содержанием без этикеток. Чтобы оценить полезность ADE-OPI-HR-MS, мы проанализировали образцы миниатюрного параллельного химического синтеза на основе планшетов.С помощью простого интеллектуального анализа данных после сбора данных можно одновременно отслеживать образование целевого продукта по сравнению с оставшимся исходным материалом. Кампания по оптимизации химической реакции показана на рис. 5, где были оценены несколько экспериментальных условий для конкретной реакции сочетания. Набор из 96 реакций был оценен как обычными методами ЖХ-МС, так и ADE-OPI-MS для одних и тех же аналитов. Примечательно, что платформа ADE-OPI-MS генерировала аналитические результаты в 60 раз быстрее (5 минут против 5 часов) и использовала в 1000 раз меньше пробы (объем ввода пробы 2.5 нл против 2,5 мкл). Для усилий по синтезу при открытии лекарств это означает значительную экономию средств и времени. Кроме того, источник ESI обеспечивает широкий охват химического пространства ( 24 ).
Рис. 5.
(A) Путь химической реакции для простой реакции сочетания с целевым продуктом C 16 H 18 N 2 ( 25 ). (B) Массовое обнаружение образования продукта в 96 различных условиях реакции с использованием ЖХ-УФ-МС. Площади пиков целевого продукта были нанесены на график в зависимости от номеров лунок.Каждая инъекция потребляла 10 мкл реакции, а анализ каждого образца занимал 3 минуты. В целом потребовалось 5 часов для анализа всех 96 реакций с использованием стандартной ЖХ-УФ-МС. (C) Тот же набор образцов был проанализирован с помощью ADE-OPI-MS. На каждую реакцию было израсходовано всего 5 нл образца. 96 образцов вводили непрерывно, а общее время анализа составляло 5 минут. Здесь представлена хроматограмма экстрагированных ионов протонированного продукта ( m / z 239,15).
Этот первоначальный набор результатов демонстрирует, что технология ADE-OPI-MS, благодаря своим рабочим характеристикам и простоте использования, может значительно расширить измерение фундаментальной массы в качестве аналитического метода выбора для экспериментов, в которых критически важен точный и чувствительный анализ. .Как показано в Таблице 1, ADE-OPI-MS предлагает высокую скорость, высокую пропускную способность и миниатюрные эксперименты; Таким образом, это позволит более широко применять и использовать технологию МС, а также повысить экспериментальное качество результатов. Высокая скорость анализа и применимость к широкому кругу классов аналитов позволяет данному прибору выполнять миллионы определений в течение нескольких месяцев, поддерживая широкий спектр типов образцов. Надежность подхода и его способность анализировать необработанные образцы с минимальной разработкой методов значительно повышают скорость всего экспериментального рабочего процесса, облегчая миниатюризацию и сохранение исходных образцов.В заключение следует отметить, что технология ADE-OPI-MS позволяет резко повысить производительность для текущих приложений ЖХ-МС и открывает двери для использования МС в новом пространстве приложений.
Таблица 1.
Обзор характеристик ADE-OPI-MS.
* экстраполировано из времени анализа 384-луночного планшета.